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羥自由基測(cè)定試劑盒原理和顯色劑的配制方法!
更新時(shí)間:2018-07-10   點(diǎn)擊次數(shù):2768次

羥自由基測(cè)定試劑盒原理和顯色劑的配制方法!

 

產(chǎn)品名稱:    羥自由基測(cè)試試劑盒
英文名稱:    Hydroxyl Free Radical assay kit
產(chǎn)品規(guī)格:    50管/48樣
保存與運(yùn)輸:    按照說(shuō)明書保存
應(yīng)用范圍:    科研用檢測(cè)試劑
比色法的基本原理是朗伯(Lambert)定律,闡述為:光被透明介質(zhì)吸收的比例與入射光的強(qiáng)度無(wú)關(guān);在光程上每等厚層介質(zhì)吸收相同比例值的光。

 

一、測(cè)定原理

Fenton反應(yīng)是zui常見(jiàn)的產(chǎn)生羥自由基的化學(xué)反應(yīng),H2O2的量和Fenton反應(yīng)產(chǎn)生的OH.量成正比,當(dāng)給予電子受體后,
用griess試劑顯色,形成紅色物質(zhì),其呈色與OH.的多少呈正比關(guān)系。

 

二、試劑組成與配制:

試劑一:3%H2O2標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液0.5ml×1支,4℃保存3個(gè)月。0.03%標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液的配制:3%H2O2標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:蒸餾水=1:99稀釋,現(xiàn)用現(xiàn)配。

試劑二:底物儲(chǔ)備液1ml×1支,4℃保存3個(gè)月。

底物應(yīng)用液的配制:

若您的樣本為產(chǎn)生羥自由基,即測(cè)定管吸光度比對(duì)照管吸光度低,則底物應(yīng)用液的配制:底物儲(chǔ)備液:蒸餾水=1:99稀釋,現(xiàn)用現(xiàn)配。
若您的樣本為產(chǎn)生羥自由基,即測(cè)定管吸光度比對(duì)照管吸光度高,則底物應(yīng)用液的配制:底物儲(chǔ)備液:蒸餾水=1:299稀釋,現(xiàn)用現(xiàn)配。

試劑三:甲液儲(chǔ)備液2ml×1支,4℃保存3個(gè)月,用時(shí)加蒸餾水1:9稀釋成應(yīng)用液。乙液7ml×2支,4℃保存3個(gè)月。

羥自由基測(cè)定試劑盒原理和顯色劑的配制方法!

試劑三應(yīng)用液的配制:甲液應(yīng)用液與乙液等比例混合,用多少配多少,余下4℃保存。

試劑四:液體10ml×1瓶,用時(shí)加蒸餾水稀釋至100ml,制備成應(yīng)用液,4℃保存。若有結(jié)晶,則放置37℃水浴至全部溶解后再稀釋。

試劑五:液體30ml×1瓶,避光4℃冰箱保存.

試劑六:液體30ml×1瓶,避光4℃冰箱保存.

試劑七:分析純的冰乙酸(冰醋酸)自備。

顯色劑的配制:試劑四應(yīng)用液:試劑五:試劑六:冰乙酸=8:3:3:2,需多少配多少,現(xiàn)用現(xiàn)配。

注:抑制羥自由基的物質(zhì)如:血清(漿)、各種組織勻漿液、口服液等;
產(chǎn)生羥自由基的物質(zhì)如:中性白細(xì)胞、某些藥物、部分植物等。

 

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